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杜瓦瓶 冻存细胞复苏的操作步骤 (1)佩戴眼镜和手套,从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。 (2)迅速放入38℃水浴中,并不时摇动,在1分钟
细胞冻存液氮罐使用过程中需要注意些啥
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杜瓦瓶
冻存细胞复苏的操作步骤
(1)佩戴眼镜和手套,从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。
(2)迅速放入38℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其完全融化,然后在无菌下取出细胞。
(3)在1000r/min速度下离心5~10分钟,弃去上层液,加入适量培养液后接种于培养瓶中,接种浓度1×109/L,置37℃温箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养,观察生长情况。若细胞密度较高,及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中,并加入培养基贴壁培养12~24小时后,充去上清,换入新鲜培养基继续培养。
细胞冻存
液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐两种。贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存,
液氮罐不宜在工作状态下作远距离运输使用;液氮运输罐为了满足运输的条件,做了专门的防震方面的设计。其除可静置贮存外物品外,还可在充装液氮状态下,作为运输使用,但是也应避免剧烈的碰撞和震动。
1.罐子在使用过程中,每天都应随时检查罐子的使用情况,在罐子内有液氮的前提下,发现罐子瓶盖上和上部有水珠或结霜情况,说明罐子质量有问题,应立即停止使用;
2.在罐子瓶盖上和上部无水珠或结霜现象时,用手触摸外壳,感觉上部冷,下部热,说明罐子质量有一些问题,即液氮日增损较大,应注意观察,防止液氮耗损完后,所贮存的物质损坏,必要时,好停止使用;若上下温度一致,说明罐子质量没有问题。
3.打开瓶塞后,瓶口内的雾气不往外溢,而往下沉,说明罐子是好的。
4.用耳朵从瓶口处听罐子内是否有气泡声,如较频繁则罐子质量有问题,反之则无问题。
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