牛精液冷冻保存

牛精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。MVE液氮罐

牛精液冷冻保存的优点：使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。可充分提高利用率。

低温保存细胞的原理，冷冻保护剂可以均匀充分地和细胞相接触，保护效果好。对组织而言，保护剂只能作用于其表面，对深层细胞无法起到保护作用。为了提高组织的存活率，应同时控制降温的速率。控制降温速率的慢速降温可以使细胞外溶液中的水结冰，导致细胞外溶液浓度升高，胞内水向膜外渗出，在达到一定温度时，将组织置于滦低温冰箱或液氮中冻存，可以减轻细胞内结晶对细胞的损伤，保持细胞的活性。

冷冻

在装有液氮的容器上置一铜纱网，距液氮面2厘米左右。将平衡后的精液用滴管按一定量滴于铜纱网，滴完最后一滴停3分钟~5分钟，当精液颗粒颜色变白时，立即浸入液氮，并将全部颗粒取下，收集于储精瓶或纱网布袋内，并做好标记，然后立即移入液氮罐中储存。

解冻

将预先配制好的9%柠檬酸的溶液1毫升，放入干净的小试管中，再置于40℃左右的温水杯中，迅速取颗粒冷冻精液1粒放入试管。轻轻摇动至化冻时，从水杯中取出试管，接着检查精液活力，即为合格品。

重视保精、快速解冻与镜检

1、根据液氮罐的性能要求，定期添加液氮，罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮外面。

2、取精时，尽可能用长镊子，切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处(罐顶10厘米左右)。

3、从液氮中取出细管冻精时，要轻轻甩一两下，将塑料细管的棉塞端放入35℃~40℃的温水中，把封口端留在水外3厘米外，待管内精液融化一半时，立即取出备用。

4、解冻后的精液镜检时，精子的活力不低于标准方可用于输精，才能确保正常受精。

5、解冻后的精液应立即输配，不宜停放时间过长，应做到现解冻，现输精。MVE液氮罐