液氮罐中的菌种活化

菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养， 逐级扩大培养是为了 得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有 一般需要 2-3 代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所 以要活化,让菌种逐渐适应培养环境 要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。 目前国际国内常用的 菌种保存方法包括： 定期移植法、 液体石蜡法、 沙土管法、 真空冷冻干燥法、 80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。 对于不同的保存方式活化的方式也不同： 1 定期移植法的菌种复苏较简单，直接转接即可; 2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上， 生长繁殖后，再重新转接一次; 3 沙土管法保存菌种在复苏时，在无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适 宜的斜面培养基上， 长出菌落后再转接一次。 或取沙土粒于适宜的液体培养基中， 增殖培养后再转接斜面; 4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部，将安瓿 管顶部烧热， 用无菌棉签沾冷水，在顶部擦一圈，顶部出现裂纹，用挫刀或镊 子颈部轻叩一下，敲下已开裂的安瓿管的顶端，用无菌水或培养液溶解菌块，使 用无菌吸管移入新鲜培养基上，进行适温培养; 5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时，从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管，应 立即放置 38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为 止，约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基 上进行培养 6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似，从 液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置在 38℃-40℃水浴中快速复苏并 适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止，一般约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或 塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基上进行培养。 总结一下菌种活化需要以下几个步骤： 第一配置菌种适宜生长的培养基 第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态，比如将冷冻的菌种解冻 第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养，此步骤称为菌种复壮 第四步挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重 复此步骤 2-3 次，从而得到生长良好的菌落 经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的。MVE液氮罐

　　有同学已经说的很专业了，我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要 进行活化。 如果你是用冻存管保存的菌株进行活化， 取出 2 颗小珠放在适宜的固 体培养基上，合上盖让小珠在平皿上滚动，适宜条件培养就可以了。长出一个菌 落，你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种，准备适宜的液体培养基，少少 一点点粉末接种就可以了，根据此菌种一般液体培养所需时间，大概在 36-48h， 你还可以在观察到液体浑浊、试管底部有沉淀时(沉淀者也可能为原本死亡的细 菌)，取 100 微升液体涂抹在固体培养基上。 一般的话，复苏的菌种需要重复几次复壮。MVE液氮罐